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上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买 创新服务 上海东寰生物科技供应

上传时间:2025-02-26 浏览次数:
文章摘要:EdU细胞增殖方法简单,方便,无需DNA变性,能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特征。为了与其他荧光共同使用,东寰生物提供多种染料供选择,覆盖常用检测通道,方便您轻松选择适合的染料,比较大限度地扩展第三方染色的适

EdU细胞增殖方法简单,方便,无需DNA变性,能够与各种抗体或荧光蛋白同时标记,以检测细胞其他性状特征。为了与其他荧光共同使用,东寰生物提供多种染料供选择,覆盖常用检测通道,方便您轻松选择适合的染料,比较大限度地扩展第三方染色的适用范围,比较大限度地满足您的检测仪器要求,完全解决您的实验难题。EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,更适合结合其他染料或蛋白标记(如P65抗体)等进行多重标记,从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢?上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买

4%多聚甲醛固定液或冷**固定液(-20℃预冷20min)。d,封闭液。e,/LPBS缓冲液。2、染色方法a,取出培养有细胞的盖玻片,用洗2-3遍。b,加入4%多聚甲醛试问固定30minc.加入的Tritonx-100,37℃,5min,PBS洗两次,5min/次d.加入含、1%BSA的PBS中室温封闭30min-1h。e.去封闭液,直接加入一抗,37℃孵育1h或4℃过夜。抗体以mo/LPBS稀释(理想的抗体浓度需经试验而定)。,10min/次g.加入FITC-二抗或TRITC-二抗,37℃,孵育1h。,10min/次,用滤纸吸干。(PBS配制)封片。j.免疫荧光显微镜下观察,或于4℃避光保存。免疫荧光双标记方法免疫荧光的双标记是指同时标记细胞内两种蛋白质分子,当怀疑某种配体与已知受体结合后可用此方法加以证明。此方法稍微复杂一些,应注意所用的一抗是来自不同种属动物的两种特异性抗体(例如:A抗体为多克隆抗体,来自家兔;B抗体为单克隆抗体,来自小鼠)。其次,两种二抗所带荧光素的发射光不应重叠,且尽量远离,通常可以选择FITC和TRITC、Alex488和TRITC、FITC和Cy5,或Cy3和Cy5等来组合。通常情况下,染色时两种一抗可以同时孵育,然后可以同时孵育两种二抗。但当染色结果一种颜色非常弱,而另一种颜色比较强时,应考虑先孵育颜色较弱的二抗。上海EdU细胞增殖检测试剂盒购买上海东寰告诉您如何正确使用EdU细胞增殖检测试剂盒?

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。

EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势如何?

EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。本试剂盒可以检测到细胞或组织样品中单个的增殖细胞,同时也可以对细胞或组织样品总体的细胞增殖情况进行定量检测。本试剂盒可以检测培养的细胞或组织样品,也可以检测组织切片,但均需提前进行EdU的掺入。细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。上海品牌EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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与BrdU方法相比,EdU检测方法无需DNA变性,无需抗原修复,无需抗原抗体反应,更简单、更灵敏、更快速、更准确,是细胞增殖检测的比较好选择。更准确--无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免变性带来的样品损伤,确保细胞核边缘清晰完整;更简单--无需抗原抗体反应,基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,反应单需要几分钟;更灵敏--无需抗体,检测染料单为BrdU抗体的1/500,更容易扩散,即使单个增殖细胞也能准确检测;更快速--无需过夜,省却了抗原抗体反应的复杂繁琐步骤,完成整个检测周期单需2.5小时;更兼容--对样品几乎无损伤,更容易与多种抗体或荧光蛋白同时标记,能够同时检测细胞其他性状特征上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒购买

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